CO₂培养箱作为细胞培养的核心设备，其温度、CO₂浓度、湿度的精准控制直接影响细胞活性与实验重复性。科学制定校准周期与规范操作方法，是保障培养环境稳定的关键。
校准周期的合理设定需结合使用频率与精度要求。温度校准建议每月进行1次，采用连续24小时监测模式，确保培养箱在37℃设定值下的波动范围≤±0.2℃；CO₂浓度校准每两周1次，重点验证5%常规浓度点的偏差(应<±0.1%)，若用于特殊浓度培养(如2%或10%)，需增加对应点校准。湿度校准可每季度1次，通过监测饱和盐溶液的平衡湿度(如硫酸钾饱和溶液对应98%湿度)验证腔内湿度达标情况(≥95%)。新设备启用前需进行全面校准，维修后的设备需立即重新校准，确保各项参数符合标准。
温度校准的规范操作需采用多点验证法。将经过计量认证的铂电阻温度计(精度±0.1℃)固定在培养箱中层中心位置，同时在四角放置辅助测温点，设定37℃恒温模式，连续记录24小时数据。若发现任一点温度偏离设定值超过0.3℃，需进入校准菜单调整：通过控制面板的温度补偿功能，以标准温度计读数为基准修正显示值，每次调整后稳定30分钟再验证，直至所有测点波动≤±0.2℃。校准过程中需关闭门体≥1小时，避免开关门导致的温度波动干扰。
CO₂浓度校准需依赖高精度标准气体。准备浓度为5%的CO₂标准气(不确定度≤±0.05%)，将气体采样管连接至培养箱的气体校准口，开启校准模式后通入标准气，流量控制在0.5L/min，持续3分钟。设备自动识别标准浓度并修正传感器读数，校准后需在正常运行模式下监测30分钟，确保浓度稳定在设定值±0.1%范围内。若使用红外传感器型培养箱，需每月用酒精清洁传感器窗口，避免水汽凝结影响检测精度。
湿度校准可采用饱和盐溶液法。在培养箱内放置盛有硫酸钾饱和溶液的培养皿(液面面积≥100cm²)，同时放入经校准的湿度计，关闭门体24小时后读取湿度值。若实测湿度<95%，需检查水盘水位(应保持2/3满)，清洁加湿装置的滤网(每月1次)，必要时更换加湿管。对于采用蒸汽加湿的机型，需验证加湿周期是否合理(通常每30分钟启动1次)，确保湿度波动≤±3%。
校准完成后需生成校准报告，记录校准日期、使用标准器具信息、各项参数偏差及调整值，报告保存期限不少于2年。建立校准台账，提前3天提醒下次校准时间，确保所有操作符合ISO 17025实验室认可要求。通过系统化校准，可使细胞培养的成功率提升20%以上，实验数据的重现性显著改善。
更新时间：2025-08-11
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